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荧光PCR冻干之Tris

日期:2020-08-05浏览:1683次

Tris又叫三羟甲基氨基甲烷。是一种白色结晶或粉末, 溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、 苯, 是一种有刺激性的化学物质。其本身有很高的缓冲能力, 在水中溶解度高,对很多酶呈惰性反应, 它的这一特性使得 Tris 成为用于许多生化目的非常满意的缓冲液。用于稳定反应体系的 pH,在 pH7.5-9.0 之间有较强的缓冲能力。其缓冲液的低离子强度特点可用于线虫核纤层蛋白的中间纤维的形成。其本身也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外还是制备表面活性剂硫化促进剂和一些药物的中间物。荧光PCR冻干体系优化方法:没有经验采用单一因素法,有一定经验的采用多因素法。单一因素法筛选出保护效果比较好的保护剂,再将保护效果好的保护剂进行组合,产生终配方。

Pilot7-12T应用示例(荧光PCR冻干):

  1. 探针、底物、引物原料要求确定。
  2. 冻干溶液配方开发,采用正交法或响应曲面法进行辅料筛选。
  3. 选择适合的包材和模具。
  4. 设计冻干曲线配合辅料筛选。
  5. 确定配方及工艺。
  6. 稳定性测试。
  7. 根据稳定性测试结果修正工艺或配方。
  8. 整个环节注意环境、设备、人员的结合。

 

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