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荧光PCR冻干之氨基酸
2020-08-01
氨基酸是含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。目前发现的天然氨基酸就有300多种，基本氨基酸也有二十个品钟。氨基酸应用于食品行业、医药行业、化妆品行业等。氨基酸是常见的蛋白质保护剂之一。在冷冻过程中,低浓度的甘氨酸可通过抑制10或100mmol/L磷酸缓冲盐结晶所致pH值的改变而阻止蛋白质药物变性。无定型甘氨酸可阻止冻干过程中重组人生长激素的聚集;结晶型甘氨酸能升高成品的塌陷温度,阻止因塌陷而引起的蛋白质药物的破坏。常用的氨基酸类蛋白质保护剂有脯氨酸、谷氨酸钠、丙氨酸、甘氨酸...荧光PCR冻干之DMSO
2020-07-27
二甲基亚砜（DMSO）是一种有机化合物，常温下为无色无臭的透明液体，是一种吸湿性的可燃液体。具有高沸点、热稳定性好、与水混溶的特性。可作有机溶剂、反应介质和有机合成中间体。也可用作合成纤维的染色溶剂、去染剂、染色载体,以及回收乙炔、二氧化硫的吸收剂。二甲基亚砜是一种既溶于水又溶于有机溶剂。广泛用作溶剂和反应试剂，具有很高的选择抽提能力。二甲基亚砜是如何应用的呢？下面简单介绍下，DMSO是一种重要的渗透型细胞保护剂。培养液中DMSO浓度为10%时，细胞生长抑制率近100%；1&...荧光PCR冻干保护剂之甲酰胺
2020-07-26
甲酰胺是一种化合物，无色透明液体，略有氨味，是合成医药、香料、染料等的原料，也可作为溶剂用于合成纤维的抽丝、塑料加工、木质酪素墨水的生产等。通过甲酸甲酯和氨的反应制备甲酰胺的方法。甲酰胺是可作为溶剂、有机合成原料、医药原料等的在工业上有用的物质。甲酰胺是被较早发现并应用的PCR冻干保护剂之一，能促进引物模板退火，能提高PCR反应的特异性。分享下荧光PCR试剂冻干的示例：(1)将荧光PCR扩增缓冲液、引物、探针、热启动Taq酶、UNG酶、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、...荧光PCR冻干之PVP
2020-07-25
聚乙烯吡咯烷酮简称PVP,是一种非离子型高分子化合物，是N-乙烯基酰胺类聚合物中被研究得深、广泛的精细化学品品种。应用于医药、化妆品、食品等行业。可做粘合剂、增溶剂、分散或共研磨剂、活性成分稳定剂等。PVP按其平均分子量大小分为四级，用K值表示，K值实际上是与PVP水溶液的相对粘度有关的特征值，而粘度又是与高聚物分子量有关的物理量，一般K值越大，其粘度越大，粘接性越强。荧光PCR冻干时，PVP能够增强PCR产物生成量，其中PVP也能有效提高PCR效率和特异性。PVP作为PCR...荧光PCR冻干保护剂之蔗糖
2020-07-24
蔗糖是由葡萄糖和果糖通过异构体羟基缩合而成的非还原性二糖。蔗糖极易溶于水其溶解度随着温度的升高而增大。蔗糖的化学性质稳定，多呈无定型结构，对阻止蛋白质二级结构改变、冻干处理过程中，贮藏期内蛋白质的伸展和聚集起重要的作用。糖对蛋白质保护作用大小有时和其浓度有关，通常在某个浓度范围内糖的保护作用随着浓度的升高而增大；当达到某一浓度时保护作用达到大值，而此后再增大糖的浓度则保护效果不再显著增加，有时反而会降低。在冻干时，其中蔗糖海藻糖等双糖对一些蛋白质均能显示出良好的保护作用，具备...荧光PCR冻干保护剂之海藻糖
2020-07-23
海藻糖又称漏芦糖、蕈糖等，是一种通过生物发酵技术从玉米、木薯等淀粉获得的安全、可靠的天然糖类。海藻糖在食品以及医药生物制品方面等广泛应用。海藻糖是怎么应用的呢？在食品中作为添加剂来改善干燥食品的质量和风味。在医药生物制品方面海藻糖因其具有高玻璃化转变温度和低吸湿性等特性，对实现蛋白等生物药品的玻璃化冻结起重要作用，既是有效的低温保护剂又是很好的冻干保护剂。海藻糖作为荧光PCR冻干保护剂的其中一种，在冻干中的应用：既能在冷冻过程中充当低温保护剂，又能在干燥脱水过程中起到脱水保护...荧光定量PCR的优点
2020-07-21
普及一下荧光定量PCR的几个优点：1、使用特异性探针对定量分子进行识别，具有很高的准确性。同时靶序列由引物和探针双重控制，特异性好、假阳性低。2、荧光PCR检测技术是综合了PCR技术、荧光标记技术、激光技术、数码显象技术为一体的技术，因此检测灵敏度高。3、荧光信号的产生和每次扩增产物成一一对应的关系，通过荧光信号的检测可以直接对产物进行定量；定量范围可在0－1010拷贝/毫升。4、扩增和检测可以在同一管内检测，一步完成，不需要开盖，不易污染。5、速度快、高通量，可在2－3小时...荧光PCR冻干保护剂-叔丁醇
2020-07-19
叔丁醇被大家认为是适合制剂的冻干溶剂。有如下特点：凝固点高，纯的叔丁醇在室温下（25℃）就可以冻结。叔丁醇的蒸汽压较高有利于升华，节省冻干时间。叔丁醇毒性低，在冻干过程中，大部分叔丁醇可在一次干燥阶段升华，在制剂中残留量很低。叔丁醇自身在冻结中形成针状结晶，能改变溶质的结晶方式，利于升华。叔丁醇也可在荧光PCR试剂当冻干保护剂使用。叔丁醇起到加快冻干进程和改善冻干微观结构的作用。冻干前的荧光PCR反应混合物原液中的浓度范围为：叔丁醇的浓度为10%-40%（v/v）。荧光PCR...荧光PCR冻干保护剂筛选方法
2020-07-19
荧光PCR冻干体系筛选范围:糖类、醇类、氨基酸类、聚合物类、大分子蛋白、无机盐类等，其组分为其中的几种的组合。优化方法：没有经验采用单一因素法，有一定经验的采用多因素法。单一因素法筛选出保护效果比较好的保护剂，再将保护效果好的保护剂进行组合，产生终配方。因此，初步筛选采用单因素法，进一步筛选采用多因素法。我们不但能提供适合荧光PCR冻干的试剂冻干机Pilot10-15T，还能为用户提供对药品、诊断试剂、蛋白、多肽、酶、抗体、抗原等进行冻干工艺优化，包括保护剂优化、冻干曲线优化...荧光定量PCR实验时的好方法
2020-07-18
实时荧光定量PCR技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，成为核酸分子定量的标准方法。在做荧光定量PCR实验时建议使用这些耗材：96孔光学反应板配合光学膜，0.2ml光学八联反应管配合光学膜，0.2ml光学八联反应管配合平盖的光学八联管盖等。在做荧光定量PCR实验时有一些好的方法分享给大家，例如在使用单管或者8连管做实验时，如果在样本数量不多的时候，建议在样品加热块（TRAY）上对称的安放样品，并且先放在第6列或者第7列...实时定量PCR之定量
2020-07-17
实时定量PCR不仅操作简便、快速高效，而且具有很高的敏感性和特异性。广泛地运用于分子生物学的各个领域。实时定量PCR在应用中有一些使用人对定量的方法上觉得存在着不容易克服的问题主要包括1.定量的方法与众多因素有关，如水、缓冲液、仪器性能等，乃至于核酸的抽提过程都会影响到结果的稳定性。2.标准品的稳定保存很难获得成功，高浓度的核酸物质易于被降解，而每次配制新的标准品又会增加批间差异。3.每次测定样本都要同时测定标准品，而热循环仪的样本孔有限，所以在单批内不能测定更多的样本，这样...冻干荧光PCR试剂之反应管
2020-07-15
冻干荧光PCR试剂冻干方法是将荧光PCR试剂经过预冻，在真空状态下进行升华，后可制备成冻干粉。冻干荧光PCR试剂时，选用的反应管在做冻干时有许多不足之处：1.由于反应管呈上宽下窄的锥字形，还需要借助其他工具支撑，这样反应管试剂与冻干机搁板的接触面积很小，升华时传热会受到限制，延长了预冻和升华的时间，反应管中的冻干程序一般在24～30小时，冻干制品日产量很低。2.反应管中的冻干，在加入冻干混合试剂后，需要进行离心处理，排出气泡，并将粘附在反应管壁上的试剂离心下来。3.反应管中的...荧光定量PCR的效率值
2020-07-15
荧光定量PCR的效率值可通过标准曲线获取。理想的反应效率为100%。效率较高（高于110%）一般说明反应过程中存在抑制作用。引起抑制作用的原因主要是RAN或者DNA质量较差，模板浓度过高及含有核酸钝化的残余物。反应效率较低（低于90%）的原因有试剂浓度不适（主要是引物、镁、Taq、DNA、聚合酶、尤其是在多重试验中）。造成效率低的其他因素有引物Tm之间的差异超过5℃或者是热循环条件不适。抑制作用和较低的效率会影响分析的灵敏度，导致动态范围减小及通用性降低。怎样解决呢？可在做冻...浅谈荧光PCR冻干芯片的方法
2020-07-14
荧光PCR冻干芯片的制备方法简单快速，易于操作，缩短冻干所需时间，一般可在八小时内完成冻干步骤。荧光PCR冻干芯片的制备方法示例,1.先要称取制备冻干保护剂如海藻糖、棉子糖、右旋糖酐、甘油、焦磷酸二乙酯处理过的水，置于容器中混合均匀，然后加热至*溶解，在放入2～8℃冷却。2.预混荧光定量PCR试剂如将PCR反应缓冲液、引物、探针、dNTPs和DNA聚合酶混合均匀；将预混的荧光定量PCR试剂和冻干保护剂混合均匀（体积比为3:1），制备成冻干试剂；取5～8μL的冻干试剂点在...荧光探针和荧光染料冻干防护
2020-07-12
冻干对荧光探针和荧光染料有防护作用，冻干可防止探针和染料降解，提高反应的灵敏度和特异性。接着介绍一下荧光探针和荧光染料的特性。荧光探针是PCR扩增时在加入一对引物的同时加入荧光探针，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成*同步。荧光染料是在PCR...这就是单效外循环浓缩器的原理的吧,这篇文章读完就感觉不错
2020-07-09
单效外循环浓缩器对溶液进行蒸发浓缩时，在中药提取、生物医药产品的提取过程中应用尤其之多。单效浓缩器应用于化工、医药、废水处理行业中，批量小，品种多的真空浓缩过程中。单效外循环浓缩器原理是利用外加热自然循环与真空负压蒸发结合的方式，将溶液进行蒸发浓缩，将溶剂和溶液进行分离。生蒸汽进入加热室，将料液加热上升，从喷管喷入蒸发室，进行气液分离，其料液从循环管回到加热室下部再进行加热，料液受热后又喷入蒸发室开成循环。当进入的料液浓缩到一定程度，自控仪表检测反馈后，由出料口出料，蒸发室蒸...中试冻干机制品升华干燥要点
2020-07-07
制品在冻干过程中的升华干燥，分为一次干燥和二次干燥。一次干燥的要点，当冻干箱内的压力降到60Pa（根据制品特点而定）以下，就可以给制品加热，为制品升华提供能量，制品升华的速度由加热能力和冷阱的捕水能力而定。但冻干箱的压力必须维持在允许的高压力以下，板层的温度在一次升华不要超过共溶点。可以通过以下现象断定一阶段干燥结束：1.干燥层和冻结层的交界面到达瓶底并消失。2.产品温度上升到接近板层的温度。3.冻干箱的压力且维持不变。上述现象发生后，至少再延长0.5~1小时，以*除制品中的...制药冻干机的性能要求
2020-07-04
制药冻干机要具备安全性、可靠性、适用性。在选择制药冻干机时要满足以下几点性能要求。1.冻干机箱体内部要采用大圆角设计，表面采用镜面抛光，箱体底部采用倾角设计，要符合FDA及GMP要求。2.冷阱要采用外置盘管，冷阱内要光亮*，避免二次污染及交叉污染。3.要采用立式冷阱快速的热水浸泡除霜，缩短间歇时间。4.干燥箱与冷阱要采用分体式结构，实现无菌隔离。5.系统密封性要好，极限真空度要≤1Pa。6.系统要有低温进箱、二次回冻（反复预冻）、自动进气和压塞、低温出箱的功能。7.要有...原位冻干机的特点及应用
2020-06-27
原位冻干机是介于小型实验室冻干机和中试冻干机之间的一款机型。原位冻干机为立式，可原位预冻，减少冻干制品的污染，冻干速度快，捕水量大，0.2平米的原位冻干机冻干时间一般为15-18个小时。板层可独立控温，冻干制品的均一度较好，有全自动程序，可设置完整的冻干曲线，通过冻干曲线可随时查询温度及真空度曲线。方便工艺优化及冻干验证。选择原位冻干机比较适合预算成本相对较低且性能又要高于小型实验室冻干机的用户。原位冻干机应用于食品、生物研究、化工、制药、医学等行业。博医康原位冻干机Pilo...板层温度及平整度的重要性
2020-06-22
在选用冻干机时板层温度均匀性及平整度是重要因素之一。板层温度均匀性和平整度越好，冻干样品的质量也就越好。如生产型冻干机板层保持高平整度要求，尤其是大板层保持高平整度要求更难。板层制作常见的方法有:打孔塞焊法、L型焊法、真空钎焊法。这些方法都是成熟的板层制作方法。无论采用哪种制作方法，想保持板层内外平整，流道阻力小，都要付出高额的制作加工代价。同样尺寸大小的一块板层，高精度加工的成本是普通加工成本的十几倍。这也是生产型冻干机造价高的原因之一。生产型冻干机LYO-15特点：箱体设...Copyright © 2018 中斯立孚（天津）生物技术有限公司 All Rights Reserved.
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