IVD试剂冻干曲线开发与关键温度测试

IVD试剂冻干曲线开发与关键温度测试

1. IVD试剂冻干曲线开发

冻干曲线是冻干过程的关键指导文件，包含预冻、一次干燥（升华干燥）和二次干燥（解析干燥）三个阶段的温度-时间关系  。

l  预冻阶段：需根据共晶点确定低的温度（通常低于共晶点5-10℃），并控制降温速率（速冻或慢冻）。例如，5-氮杂胞苷-D-甘露醇溶液共晶点为-6.54℃，预冻温度选定为-25℃

l  一次干燥（升华干燥）：温度需低于共熔点（如-1.67℃），真空度控制在10-30 Pa，升温速率通常为2℃/min。如尿促性素一次升华温度为-12.5℃，维持70分钟

l  二次干燥（解析干燥）：需缓慢升温至更高温度（如20-40℃），确保残留水分都去除。例如，硼替佐米二次升华阶段温度分别于5℃、20℃和40℃维持300分钟、110分钟和220分钟

2. IVD试剂关键温度测试

冻干关键温度测试是确定冻干曲线的基础，主要包括以下参数：

l  共晶点测试：

n  DSC热分析法：通过差示扫描量热仪测定，如5-氮杂胞苷-D-甘露醇溶液的共晶点为-6.54℃

n  电阻法：当物料冷冻温度降至某一值，物料全部冻结，电阻突然增大，该温度即为共晶点

l  共熔点测试：通过DSC测定，当温度升至某一值时冰晶开始熔化，该温度即为共熔点l  玻璃化转变温度测试：通过DSC测定，如GGT试剂的玻璃化转变温度为-18.75℃

l  塌陷温度测试：

n  冻干显微镜法：实时观察冻干过程中样品结构变化，当干燥层温度上升到某一临界值时，固体基质的刚性不足以维持蜂窝状结构，空穴的固形物基质壁发生塌陷，该临界温度即为塌陷温度

n  介电分析法：通过介电性能的变化判定塌陷温度