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荧光定量PCR实验时的好方法

日期:2020-07-18浏览:1110次

实时荧光定量PCR技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,成为核酸分子定量的标准方法。在做荧光定量PCR实验时建议使用这些耗材:96孔光学反应板配合光学膜,0.2ml光学八联反应管配合光学膜,0.2ml光学八联反应管配合平盖的光学八联管盖等。在做荧光定量PCR实验时有一些好的方法分享给大家,例如在使用单管或者8连管做实验时,如果在样本数量不多的时候,建议在样品加热块(TRAY)上对称的安放样品,并且先放在第6列或者第7列,然后逐渐向两边放置。这样热盖压下来的时候不至于发生倾斜,每个反应管的受力和受热都比较均匀,提高了孔与孔之间的数据精密性。又例如使用96孔板做实验的时候,建议使用光学膜代替盖子来密封反应孔。封膜的方法要先沿着96孔板的纵向压膜,然后在横向,后在沿着板的边缘按压密封。Pilot5-8T冻干机应用示例(荧光PCR冻干):

  1. 探针、底物、引物原料要求确定。
  2. 冻干溶液配方开发,采用正交法或响应曲面法进行辅料筛选。
  3. 选择适合的包材和模具。
  4. 设计冻干曲线配合辅料筛选。
  5. 确定配方及工艺。
  6. 稳定性测试。
  7. 根据稳定性测试结果修正工艺或配方。
  8. 整个环节注意环境、设备、人员的结合。

 

型号

Pilot3-6T

Pilot5-8T

Pilot7-12T

Pilot10-15T

冻干面积

0.42

0.56

0.84

1.05

22西林瓶装量(20ML

≥900

≥1170

≥1500

≥2100

16西林瓶装量(5ML

≥1700

≥2210

≥3100

≥4100

冷阱温度(空载)

-85

真空度(空载)

≤1Pa

板层温度(空载)

-55

板层制冷方式

硅油循环

板层数量

3+1

4+1

4+1

5+1

板层尺寸(mm

350*400

350*400

350*600

350*600

捕水能力

6L

8L

12L

10L

冻干效率

3L/24H

5L/24H

7L/24H

10L/24H

板层间距

100mm

80mm

90mm

100mm

穿墙隔离

冻干曲线拟合度

100%

100%

100%

100%

晶型控制

蒸汽分压控制

升华结束判定

冻干终点测试

压塞

液压

整机尺寸 (约)

W860*D1400*H1800

W860*D1400*H1800

W860*D1700*H1900

W860*D1700*H1900

 

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