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荧光定量PCR的效率值

日期:2020-07-15浏览:1675次

荧光定量PCR的效率值可通过标准曲线获取。理想的反应效率为100%。效率较高(高于110%)一般说明反应过程中存在抑制作用。引起抑制作用的原因主要是RAN或者DNA质量较差,模板浓度过高及含有核酸钝化的残余物。反应效率较低(低于90%)的原因有试剂浓度不适(主要是引物、镁、Taq DNA、聚合酶、尤其是在多重试验中)。造成效率低的其他因素有引物  T  m之间的差异超过5℃或者是热循环条件不适。抑制作用和较低的效率会影响分析的灵敏度,导致动态范围减小及通用性降低。怎样解决呢?可在做冻干时降低模板浓度,优化工艺曲线等。试剂冻干机Pilot7-12T提供对药品、诊断试剂、蛋白、多肽、酶、抗体、抗原等进行冻干工艺优化,包括保护剂筛选、冻干曲线优化、冻干稳定性测试、冻干生产工艺设计等。

 

 

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